Альманах «Знак вопроса» - Знак вопроса, 2003 № 03

Журнал «Тайм», сообщая об этом успехе ученых, пророчески писал, что «однажды при некоторой вариации метода он может быть использован при клонировании животных — племенных быков — и даже человека»! Как в воду глядели. Вторым технологическим «прорывом» было использование суррогатной матери, которая получает зародыш «извне». Возможность суррогатного материнства у мышей доказала, что гормоны способны творить чудеса.

Четвертого января 1985 года весь мир облетела сенсационная новость: жительница северного Лондона по имени Мэри Коттон стала первой в мире суррогатной матерью, выносив и успешно родив девочку для американских приемных родителей. Девочка была даже на сутки «арестована», поскольку лондонцы протестовали против «разбазаривания национального достояния», но потом все успокоились и по распоряжению министра внутренних дел ребенка с кормилицей отпустили за океан. А потом чуть ли не каждая страна гордилась своей первой суррогатной матерью, в том числе и мы.

В своей статье «По образу и подобию» я рассказывал об успехе Джералда Холла из университета им. Джорджа Вашингтона в американской столице. Ему вместе с сотрудником Р. Стилманом удалось впервые клонировать человеческие зародыши. Из 17 эмбрионов было получено в целом 48 клонов, то есть в среднем по три на каждый исходный.

Наибольший успех был получен на стадии 2–4 зародышевых клеток. В 8-клеточном каждая из клеток получается уже слишком дифференцированной, чтобы «безболезненно» перенести разделение с помощью ферментов на отдельные «составляющие». Некоторые клонированные эмбрионы достигали стадии 32 клеток, когда их обычно подсаживают в матку. Ученые же просто «приостанавливали» их развитие, т. е. убивали согласно требованиям федеральных властей. Тем не менее психологический и технологический порог был преодолен. Оставалось ждать всего три года…

Через три года «Медицинская газета» опубликовала мою статью, которую я озаглавил «Без мужского начала». Редакция предпослала тексту врезку, начинавшуюся словами: «Хороша парочка — баран да ярочка». Тем самым подчеркивалось разделение высших организмов на два пола и в то же время равно необходимое участие обоих полов в деле воспроизведения потомства.

Далее в статье рассказывалось о сенсационном на тот момент достижении ученых из института в Рослине, пригороде Эдинбурга, который уже упоминался выше. Журнал «Нейчур» сообщил об очередном успехе ученых как раз накануне Международного женского дня.

Начиналось все как обычно. Обычным половым путем были получены 9-дневные эмбрионы горной уэллской породы с белой шерстью. После чего из зародышевых клеток сделали культуру, которую неоднократно «обновляли» в ходе последовательных пассажей. Благодаря этому клетки стали уплощенными и похожими на клетки эпителия, покрывающего, например, внутреннюю поверхность щеки.

Опыты показывают, что успешное развитие эмбриона зависит от синхронизации перенесенного ядра и цитома-реципиепта. Известно, что цитоплазматические белки и ферменты могут повреждать хромосомы перенесенного ядра. Это приводит к рассогласованию синтеза ДНК, мутациям и даже озлокачествлению клеток, что крайне нежелательно.

С этой целью и производят синхронизацию циклов ядра и цитоплазмы. Это делается с помощью биотехнологических продуктов в виде различных протеинов и гормонов. В частности, яйцеклетки от черноголовых овец шотландской породы получали после инъекций гормона гонадотропина, стимулирующего «созревание» граафовых пузырьков в яичниках и их разрыв с высвобождением ооцитов.

Готовность яйцеклеток к «оплодотворению» оценивалась по появлению в них так называемых маркеров диффе-ренцировки — белков цитокератина, которого много в наших кератиноцитах кожи, дающих ороговевающий эпителий (от греч. «керос» — рог), и ядерного ламина. Ламин образует «слои», отсюда такие знакомые теперь слова, как «ламинирование «и «ламинат». Появление этих белков сигнализирует о том, что цитом яйцеклетки «готов» к ядерному трансферу, то есть переносу чужого ядра.

После осуществления «подготовки» яйцеклеток из них удалили собственные ядра и в «пустую» цитоплазму перенесли ядра клеток эмбриональной культуры, несущие двойной набор хромосом (от отца и от матери). Напомним, что эти клетки были от белошерстных овец. После формирования зародыша его переносили в матку суррогатной овцы, которая и вынашивал плод до рождения ягненка. Наступление беременности проверяли с помощью ультразвука.

У семи овечек, «оплодотворенных» подобным образом, начали развиваться восемь эмбрионов. Через положенное время у серых черноголовых мамаш родились пять совершенно белых ягнят. Двое из них дожили на момент публикации до 9-месячного возраста. Что сулит нам новая работа шотландских ученых? — задавал я вопрос в конце статьи. Тогда автор еще и представить себе не мог, что до рождения Долли осталось меньше года!

Но тем не менее предпоследний абзац начинался с вопроса, «а как насчет людей?». Далее я писал, что «при генетических заболеваниях типа дальтонизма и гемофилии важно получать только девочек. Пока мы не научились «исправлять» гены. А в перспективе нет теоретических запретов получения культуры клеток женщины, одним из ядер которой можно будет «оплодотворить» лишенную хромосомного материала цитоплазму яйцеклетки (своей или чужой). И таким образом получить свою абсолютную копию!

Пока, правда, это возможно только теоретически, поскольку природа наложила «запрет» на развитие оплодотворенной яйцеклетки без внесения мужского начала. Но кто знает, может через несколько лет ученые научатся снимать и этот запрет…»

Как это было

Раньше ученые считали, что клонирование животного из взрослой клетки невозможно. Хотя каждая клетка содержит полный набор генов, необходимый для развития всего организма, во взрослом клетке нет доступа ко всем генам ДНК. а только к тем, что нужны для развития клеток данного органа. Ученые из Шотландии сумели заставить работать все гены одной взрослой клетки, необходимые для развития овцы.

Схема «получения» Долли

1. ОВЦА-ДОНОР

2. ИЗОЛИРОВАННАЯ КЛЕТКА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

3. «СПЯЩАЯ» КЛЕТКА, ГОТОВАЯ ДЛЯ КЛОНИРОВАНИЯ

4. ЖИВОТНОЕ,　ОТ КОТОРОГО ВЗЯЛИ ЯЙЦЕКЛЕТКУ　

5. ЯЙЦЕКЛЕТКА　

6. ЯЙЦЕКЛЕТКА БЕЗ ЯДРА　

7. СЛИЯНИЕ ДВУХ КЛЕТОК　

8. ДЕЛЕНИЕ　

9. СУРРОГАТНАЯ МАТЬ　

10. ГЕНЕТИЧЕСКИЙ ДУБЛИКАТ　

1. У овцы финн-дорсетской породы берут клетку молочной железы для клонирования

2. Клетка молочной железы содержит полный генетический код, необходимой для развития овцы, но в активном состоянии находятся только гены, которые требуются для выращивания клеток молочной железы.