П. Вяткина - Полный медицинский справочник фельдшера

Пипеточные дозаторы

Это бесклапанные дозаторы. Забор и выдача пробы осуществляются через один и тот же наконечник дозатора. Забор дозирующей жидкости осуществляется в съемную насадку (наконечник). Пипеточные дозаторы нашли самое массовое применение в лабораторной практике.

Пипеточный диспенсер (степпер) осуществляет разовый забор дозируемого раствора в наконечник пипеточного дозатора. Затем через этот же наконечник осуществляется многократное пошаговое дозирование.

Пипеточный дилютер – через наконечник осуществляется последовательно забор различных жидкостей разных объемов. Через этот же наконечник выдается весь суммарный объем жидкости, находящейся в нем.

Дозаторы подразделяются по способу установки дозы на дозаторы с фиксированным объемом дозы и дозаторы с регулируемыми переменными объемами дозы. Первыми в мире регулируемыми пипетками были пипетки фирмы Labsystems.

Дозаторы подразделяются по количеству каналов дозирования на дозаторы одноканальные и многоканальные. Многоканальные дозаторы наиболее удобны при работе с микропланшетами и стрипами.

По способу управления дозаторы делятся на дозаторы с ручным приводом, автоматическим приводом и автоматическим приводом и автоматическим управлением – электронные дозаторы.

Новым этапом в развитии технологии дозирования явились электронные пипетки. Финская компания BIOHIT предлагает широкую гамму однои многоканальных дозаторов.

Электронные микродозаторы имеют преимущества в сравнении с механическими:

1) возможность замены нескольких обычных и специальных пипеток одной электронной, в том числе таких, как диспенсер, дилютер и миксер;

2) возможность дозирования в диапазоне от 0,2 до 25 000 мкл;

3) более высокая точность дозирования и воспроизводимость по сравнению с механическими пипетками;

4) легкость управления и небольшой вес позволяют в течение рабочего дня выполнять более 1000 манипуляций;

5) автоматическая калибровка;

6) возможность подзарядки от сети.

Для разделения неоднородных жидких сред применяется центрифугирование. Разделение веществ с помощью центрифугирования основано на разном поведении частиц в центробежном поле.

В центробежном поле частицы, имеющие разную плотность, форму или размеры, осаждаются с разной скоростью.

Препаративное центрифугирование заключается в выделении биологического материала для последующих биохимических исследований. С помощью препаративного центрифугирования выделяют большое количество клеточных частиц для изучения их морфологии, структуры и биологической активности.

Препаративные центрифуги можно подразделить на 3 основные группы: центрифуги общего назначения, скоростные центрифуги и препаративные ультрацентрифуги.

Центрифуги общего назначения обеспечивают центрифугирование с максимальной скоростью 8 тыс. оборотов в минуту. Они отличаются друг от друга емкостью и имеют ряд сменных роторов: угловых и с подвесными стаканами или другими контейнерами.

Центрифужные пробирки вместе с их содержимым должны быть тщательно уравновешены. Необходимо загружать четное число пробирок в ротор, размещая их симметрично.

Скоростные центрифуги развивают скорость 25 тыс. оборотов в минуту. Камера ротора снабжена системой охлаждения для предотвращения нагревания, возникающего при вращении ротора.

Препаративные ультрацентрифуги обеспечивают центрифугирование со скоростью до 75 тыс. оборотов в минуту.

К центрифугам специального использования относятся рефрижераторные центрифуги, центрифуги с нагревательной рубашкой и др.

Аналитическое центрифугирование применяется для изучения чистых препаратов макромолекул или частиц, например рибосом.

В данном случае используется небольшое количество материала. Седиментация исследуемых частиц непрерывно регистрируется с помощью специальных оптических систем. Метод позволяет получать данные о чистоте, молекулярной массе и структуре материала.

Аналитические центрифуги развивают скорость до 100 тыс. оборотов в минуту. Через заданные промежутки времени седиментирующий материал можно фотографировать.

Для проведения лабораторных анализов необходимы термостатирующие устройства, которые могут быть в виде самостоятельных приборов или могут входить в качестве блоков в общую структура автоматических анализаторов.

Термостаты по принципу передачи тепловой энергии подразделяются на жидкостные, суховоздушные, сухие.

В жидкостных термостатах передача тепловой энергии от источника тепла к объекту термостатирования происходит через жидкую среду. Такие термостаты обладают высокими метрологическими характеристиками.

В лабораторной практике широкое распространение получили суховоздушные и сухие термостаты. В суховоздушных термостатах тепловая энергия передается за счет циркулирующего потока воздуха. В сухих термостатах передача тепловой энергии идет через массивный металлический блок к объекту: пробирке, колбе.

Выбор способа термостатирования определяется назначением, емкостью и формой термостатируемого объекта.

С целью ускорения проведения реакции и улучшения воспроизводимости результатов исследования применяются перемешивающие устройства. Выбор типа движения и его характеристик от простейшего качающего и вращательного движения до сложного знакопеременного ротационного движения зависит от конкретного назначения устройства. Перемешивание не должно вызывать появления пены и пузырей, которые могут повлиять на результаты измерений.

В автоматических анализаторах перемешивание может осуществляться непосредственно струей впрыскиваемого в кювету автоматическим дозатором реагента.

Гемолиз

Гемолизированная сыворотка и плазма непригодны для анализа многих компонентов (железа, ЛДГ, кислой фосфатазы, АсАТ, АлАТ, калия, магния, креатинина, билирубина, белковых фракций, осадочных проб и т. д.) в силу различных причин (более высокого содержания компонентов в эритроцитах и перехода веществ из них в сыворотку (плазму при гемолизе); химической или оптической интерференции гемоглобина в методах.

Видимый гемолиз распознается при пограничной концентрации гемоглобина 0,2 г/л. Уже при концентрации 1,0 г/л сыворотка плазма окрашивается в отчетливо красный цвет.

БилирубинемияИнтерферирует в методах, основанных на фотометрических измерениях в коротковолновой области спектра видимого света (300–500 нм). Однако путем постановки холостых проб на сыворотку или разведения пробы (креатинин, изменения порядка добавления реактивов, экстракции, снижающих влияние билирубина) удается получить приемлемые результаты.