Неизвестен Автор - Судебная медицина

В дальнейшем в крови человека открывали все новые и новые антигены и антитела. На смену учению о группах крови пришло учение об изосерологических системах. Четыре описанные группы вошли в эритроцит-арную изосерологическую систему АВО, три группы: М, N и MN, ранее известные под названием "типы крови", - в систему MNSs и т. д. В настоящее время насчитывается еще несколько эритроцитарных изосерологических систем: Р, Rh (резус), Ласерен, Даффи, Келл, Кидд, Диего и т. д., в которые входит много антигенов. Кроме того, оказалось, что в сыворотке крови содержатся особые антигены, которые позволили разделить человеческую кровь еще и на сывороточные изосерологические системы - -Cm,-Ос, Нр и др. Одна система Льюис является как бы промежуточной: входящие в нее антигены свойственны сыворотке, но одновременно фиксированы и на эритроцитах. Возможность различных сочетаний групповых факторов стала исчисляться сотнями тысяч, и появилась реальная перспектива достигнуть в будущем индивидуальной диагностики крови.

Групповые антигены изосерологической системы АВО, MNSs и Rh содержатся не только в крови, но и в фиксированных клетках тканей тела.

Таковы достижения гематологии и иммунологии, но не все они имеют одинаковое значение для судебноме-дицинской экспертизы вещественных доказательств в силу различных причин: затруднения в получении тех или иных стандартных сывороток для выявления соответствующих групповых антигенов; чрезмерно большая или, наоборот, малая частота встречаемости какого-либо антигена в крови населения данной страны; неустойчивость его в высохшей крови и пр.

Основное место в судебномедицинских исследованиях занимает изосерологическая система АВО; иногда в следах крови определяют группы систем Р, Льюис (в распоряжении экспертов имеются необходимые для этого стандартные сыворотки отечественного производства), Gm и др.

Судебномедицинский эксперт начинает проведение экспертизы с исследования образцов жидкой крови, для чего применяет реакцию агглютинации. Каждый образец крови разделяют на эритроциты и сыворотку. К исследуемым эритроцитам добавляют стандартные сыворотки а и р., а к исследуемой сыворотке - стандартные эритроциты групп А и В. Реакцию осуществляют в пробирках с применением центрифугирования и последующей микроскопической проверкой полученных результатов (таблица 1). Эритроциты дополнительно исследуют гетероиммунными сыворотками анти-А и анти-В, т. е. сыворотками, изготовленными путем иммунизации животных человеческими эритроцитами группы А или В, а также сывороткой анти-О(Н). Вместо последней нередко пользуются растительными экстрактами анти-Н.

Таблица 1

Схема определения групп изосерологической

Исследуемые Исследуемая эритроциты сыворотка + стандартные стандартные сыворотки эритроциты групп Группы крови

в а А В

- - + + 0а в (I) - + - + Ав (II) + - + - Ва (III) + + - - АВ0 (IV)

системы АВО в жидкой крови

Затем исследуют образцы крови, высушенные на марле, и контрольную марлю. Детальное изучение образцов крови потерпевших и подозреваемых необходимо для выяснения их особенностей, правильного выбора в каждом конкретном случае стандартных реагентов, методики и техники исследования, что обеспечивает успех экспертизы.

Далее определяют группы в следах крови на вещественных доказательствах, исследуя при этом контрольные участки предмета-носителя, взятые из мест, расположенных рядом со следами крови. Последнее делают для предотвращения ошибочных выводов, так как материалы вещественных доказательств, особенно загрязненные, могут неблагоприятно действовать на стандартные реагенты и имитировать наличие в крови того или иного группового фактора.

Основным методом обнаружения агглютиногенов в высохшей крови является метод абсорбции. Принцип его заключается в связывании агглютинина одноименным агглютиногеном. Делают три одинаковые навески материала из пятна крови и три таких же навески из соответствующего контрольного участка предмета-носителя. К одной из них добавляют сыворотку р или анти-В, к другой - сыворотку а или анти-А, к третьей - сыворотку анти-О(Н) или растительный экстракт анти-Н. Ингредиенты оставляют на 18 - 24 часа в рефрижераторе при температуре от + 4° до + 8°. Затем сыворотки (экстракт), находившиеся в контакте с исследуемыми объектами, т. е. абсорбированные, отделяют от материала и титруют стандартными эритроцитами: сыворотки |3 и анти-В эритроцитами группы В, сыворотки а и анти-А эритроцитами группы А, сыворотку анти-О(Н) и экстракт анти-Н эритроцитами группы 0.

Если в пятне крови содержится агглютиноген А, то он свяжет агглютинин а (анти-А) и абсорбированная сыворотка а (анти-А) либо вовсе перестанет агглютинировать стандартные эритроциты группы А, либо титр ее окажется значительно сниженным, а сыворотка |з (анти-В) останется неизмененной, т. е. будет продолжать агглютинировать стандартные эритроциты группы В так же или почти так же, как и ранее. Когда в крови наряду с основным агглютиногеном А присутствует агглютиноген Н, абсорбированная сыворотка анти-О(Н) или абсорбированный экстракт анти-Н тоже в той или иной мере утратят способность агглютинировать эритроциты группы бит. д. (таблица 2).

Неблагоприятные воздействия контрольных участков материала вещественного доказательства на реагенты (сыворотки и экстракты) в процессе реакции абсорбции эффективно преодолевают методом "нагрузки" агглютининами и лектинами, т. е. повторной реакцией абсорбции с навесками объектов, уже подвергнутых первому исследованию.

Схема обнаружения агглютиногенов изосерологической системы АВО в

высохшей крови путем реакции абсорбции

Объект исследования Сыворотки Экстракт анти-Н Обнаруженные

агглюти-ногены

Р (анти-В) а (анти-А)

Пятна крови исходная абсорбированная исходная абсорбированная исходный абсорбированный

№1 + + + + + - 0 №2 + + + - + - А, Н №3 + - + + + - В, Н №4 + - + - + + А, В

В последние годы разрабатываются методы ("смешанная агглютинация", абсорбция-элюция), позволяющие обнаружить групповые антигены в чрезвычайно малых следах, например в пропитанных или помаранных кровью ниточках материи длиной 2 - 3 мм.

Исследование агглютиногенов сопровождают выявлением в крови агглютининов, для чего применяют метод покровного стекла по Латтесу или способ экстрагирования.

Определение групп изосерологических систем Р и Льюис осуществляют только методом абсорбции, поскольку естественные агглютинины анти-Р и анти-Льюис не присутствуют в крови человека так регулярно, как агглютинины а и (3. Дифференцируют две группы системы р. р + и P - (р) и три группы системы Льюис: Le(a + b - ), Le(a - b + ) и Le(a - b - ). Обе эти системы представляют для судебномедицинской экспертизы крови меньший интерес, чем система АВО, так как группа Р+ очень распространена у населения большинства стран, в том числе и СССР, а на результаты определения групп системы Льюис весьма неблагоприятно влияют загрязненные материалы вещественных доказательств.