Александр Садовников - Лаборатория Доктора Зло. Ковид-19: тайна и ложь Америки

Ссылка на интересные фото: https://www.si.com/more-sports/2020/05/27/johan-hultin-the-virus-hunter. Человек с садовыми ножницами на снимке – это микробиолог Йохан Халтин.

Могила-морозильник оставалась нетронутой в течение 33 лет, пока в 1951 году Халтин не получил разрешение у местных властей на ее раскопки, объяснив это чрезвычайной важностью для науки. В итоге он сумел извлечь из останков нескольких захороненных легочную ткань, однако довезти вирус в жизнеспособном состоянии до лаборатории ему не удалось – подвело отсутствие как таковых мобильных морозильников. Свою идею-фикс он отложил на целых 46 лет.

В 1997 году этому неугомонному фанату убийственного микроба попалась на глаза научная статья в журнале Science: «Первоначальная генетическая характеристика „испанского“ вируса гриппа 1918 года». Ее автор – Джеффри Таубенбергер, молекулярный патолог из Института патологии вооруженных сил США, тоже активно интересовался «испанкой» и вместе с группой сотрудников разработал метод выделения генетического материала из вирусов. В поисках патогена этот военный микробиолог исследовал ткани двух военнослужащих, умерших во время пандемии 1918 года. Недостатком его поисков было то, что он искал не в вечной мерзлоте, хотя ему и удалось расшифровать часть генома данного микроорганизма.

Халтин предложил свои услуги, и на этот раз ему улыбнулась, с позволения сказать, «удача». Дальше вы знаете: на глубине 7 футов в той самой могиле на Аляске он обнаружил хорошо сохранившееся тело молодой женщины, которую он назвал «Люси», из которого он извлек легочную ткань. Теперь новые методы консервации позволили довезти в целости и сохранности этот смертоносный образец до военной лаборатории. Хоть вирус опять не был жизнеспособен, но он сохранил в целости свою структуру. Но находка, на данной стадии представляющая в плане микробиологии пока лишь археологический интерес, попала к тем самым людям, которые были в состоянии опять превратить ее в абсолютное зло.

Как думаете – почему поисками «испанки» заинтересовался именно Институт патологии вооруженных сил США, а не службы эпидемиологического надзора? Ответ прост – сам вирус попросту исчез, никакой опасности уже не нес, однако как биологическое оружие он представлял огромный интерес. В первую очередь военных микробиологов интересовала причина столь высокой вирулентности «испанки», то есть, ее заразности и смертности. С этой целью, получив от Халтина законсервированный вирус, в 1999 году им удалось секвенировать, то есть описать наиболее интересную часть его генома, а именно – гемагглютинин (НА). Это поверхностный белок, ответственный за проникновение вируса в здоровую клетку и ее заражение. В 2000 году они секвенировали другой поверхностный белок, ответственный за развитие инфекции – нейраминидазу. Весь геном вируса 1918 года содержит восемь генных сегментов, и был полностью секвенирован к 2005 году.

Выше мы проанализировали, как происходит заражение коронавирусом. Сейчас рассмотрим, как устроен вирус гриппа и как он заражает организм. Вирион, то есть единичная инфекционная частица, имеет сферообразную форму диаметром 100—120 нм. Поверхность вириона покрыта «порослью» шипов-крючьев, которые состоят из указанного выше гемагглютинина, своими «крючьями» цепляющегося к рецепторам на поверхности клеток в дыхательных путях.

Кроме шипов-крючьев есть еще несколько грибовидных выступов другого указанного выше белка – нейраминидазы. Ген нейраминидазы, в свою очередь, отвечает за кодирование поверхностных белков NA вируса. Этот белок позволяют вирусу вырваться из инфицированной клетки и инфицировать другие клетки, то есть, он играет важную роль в распространении инфекции. Именно гемагглютинин (H) и нейраминидаза (N) определяют идентичность вируса. Известно о шестнадцати видов гемагглютинина и девяти – нейраминидазы. Основные типы гриппа представляют собой комбинации двух из них, в случае «испанки» это как раз H1N1.

Ссылка: https://www.cdc.gov/flu/pandemic-resources/reconstruction-1918-virus.html

Здесь надо пояснить, что геном является полным списком генетических инструкций, из которых состоит организм. Другими словами, Таубенбергер и его коллеги создали инструкцию по возрождению вируса методом синтетической биологии. По результатам секвенирования они смогли описать историю мутации вируса гриппа, отнеся его к «птичьему» типу. При этом авторы заявили, что «не обнаружили никаких генетических изменений в гемагглютинине вируса 1918 года, которые могли бы объяснить его исключительную вирулентность». По их словам, «вероятно, существует несколько генетических факторов, ответственных за серьезность вируса 1918 года». (Ссылка та же). По понятной причине, а именно имея в виду разработку на основе полученных знаний новых видов биологического оружия, эти военные микробиологи скрыли правду о причине вирулентности. Она всплыла позднее.

Дорожная карта по возрождению «испанки» была создана, но для реализации на практике был необходим еще один важный элемент – нужно было запустить обратный генетический процесс, заключающийся в создании так называемых «плазмид» для каждого из восьми генных сегментов вируса 1918 года. Плазмиды – это небольшие молекулы ДНК, физически обособленные от хромосом и способные к автономной репликации, то есть, самовоспроизведению.

Далее свою долю ответственности за возрождение «испанки» взяли на себя известные микробиологи Питер Палезе (запомним эту фамилию) и Адольфо Гарсия-Састре из Медицинской школы Маунт Синай в Нью-Йорке. Несколькими годами ранее Палезе смог первым использовать плазмиды в обратной генетике для получения жизнеспособных вирусов гриппа. Разработанные им методы легли в основу реконструкции вируса 1918 года. Созданные этой парой ученых плазмиды были отправлены в Центры по контролю и профилактике заболеваний (CDC), где был запущен официальный процесс реконструкции.

Непосредственно саму сборку вируса «испанки» в том же 2005 году, в лаборатории уровня BSL-3 CDC в Атланте, провел научный сотрудник этой организации Терренс Тампи (Terrence Tumpey). Используя дорожную карту Таубенбергера и его коллеги Энн Рид и технологию обратной генетики, он вставил полученные плазмиды в клетки почек человека и запустил процесс воссоздания вируса.

Для оценки патогенности полученного вируса первоначальные исследования провели на мышах. Одновременно, для сравнения, другие мыши были инфицированы иными вирусами гриппа. Реконструированный вирус «испанки» поразил скоростью своего копирования и распространения инфекции в мышиных легких. Например, через четыре дня после заражения количество вируса «испанки» было в 39 000 раз больше, чем в других вариантах вируса гриппа. При этом мыши с «испанкой» теряли вес и умирали, а сама летальность оказалась выше в 100 раз!