В. Губанищев - 9 месяцев день за днем

Основные этапы метода.

1. Иммунизация хорионическим гонадотропином кроликов для получения антисыворотки. Антигенную эмульсию готовят из растворенного хориогонина в дозе 300 ЕД в 0,4 мл изотопического раствора натрия хлорида и 0,6 мл вазелинового масла. Полученную эмульсию вводят крольчихам массой до 2,5 кг под кожу трижды, с интервалами между инъекциями в 2 недели. Через 2 недели после последней подкожной инъекции крольчихе вводят в ушную вену 3000 ЕД хориогонина. Через 10–12 дней титр антител в крови животного достаточен для проведения реакции.

2. Обработка антисыворотки.

Взятую у иммунизированной крольчихи из ушной вены кровь оставляют на сутки в холодильнике при температуре 4ºC. Через сутки верхний слой (антисыворотку) разливают в пробирки по 1,5 мл и помещают на 30 мин на водяную баню для инактивации при температуре – 56ºC. После обработки антисыворотки азидом натрия ее замораживают. В таком виде антисыворотка может храниться длительное время. Перед применением антисыворотку подвергают «истощению», для чего 1,5 мл ее смешивают с 0,75 мл формалинизированных эритроцитов и затем оставляют при комнатной температуре.

3. Обработка эритроцитов.

Для выполнения данной методики свежие эритроциты овцы отмывают фосфатно-солевым буферным раствором РН 7,2 и затем подвергают специальной обработке хорионическим гонадотропином.

4. Определение хорионического гонадотропина в исследуемой моче.

Утреннюю порцию мочи (2–5 мл) фильтруют через бумажный фильтр, затем готовят ее разведение 1:5. В две пробирки (опытную и контрольную) наливают по 0,25 мл разведенной мочи; затем в опытную пробирку добавляют 0,2 мл антисыворотки, в контрольную – 0,2 мл буферного раствора. Результаты реакции регистрируют через 1–1,5 ч. Если реакция не произошла (хорионический гонадотропин связал антитела), то диагноз беременности подтверждается в моче (содержит хорионический гонадотропин). Точность метода составляет 98–99 %.

К иммунологическим методам диагностики ранних сроков беременности относится реакция с диагностикумом гравимуном.

В основе метода лежит обнаружение в моче хорионического гонадотропина, являющегося антигеном в тесте торможения гемагглютинации в реакции «антиген – антитело».

Для проведения исследования утреннюю порцию мочи фильтруют; затем в ампулу с гравимуном добавляют 0,4 мл фосфатного буфера хлорида натрия и 2 капли мочи. Результат реакции оценивают через 2–3 ч.

Если исследуется моча беременной, то произойдет торможение реакции связывания «антиген – антитело» за счет присутствия хорионического гонадотропина. В пробирке эритроциты оседают на дне в виде узкого кольца или пуговицы, что свидетельствует о положительной реакции на беременность.

Таким образом, диагностика ранних сроков беременности основывается на совокупности предположительных и вероятных признаков, в том числе и иммунологических реакций на хорионический гонадотропин. Если диагноз беременности сомнителен, то подтвердить его можно при повторном обследовании через 2 недели при соответствии увеличения размеров матки гестационному сроку.

Диагностика поздних сроков беременности основывается на обнаружении достоверных признаков, свидетельствующих о наличии плода в матке:

1) прощупывание частей плода (определение головки, тазового конца, мелких частей);

2) определение движений плода (обнаруженного при пальпации или аускультации);

3) выслушивание сердечных тонов плода (сердечные тоны плода слышны при аускультации с частотой 120–140 ударов в минуту). Движения плода сама беременная женщина ощущает с 20-й недели при первой беременности и с 18-й недели при повторной беременности, но подобные ощущения нельзя отнести к достоверным признакам, так как за шевеление плода женщина может принять перистальтику кишечника.

Для диагностики поздних сроков беременности достаточно и одного из достоверных признаков.

Среди многих методов диагностики беременности наибольшее практическое значение имеет в настоящее время ультразвуковое исследование (УЗИ).

Во многих странах эхография стала ведущим методом исследования в акушерстве, так как этот метод отличается высокой информативностью, позволяет визуализировать плод, плаценту, пуповину, околоплодные воды, стенки матки и т. д. При ультразвуковом исследовании плода производится прежде всего фетометрия, что дает полное представление о соответствии развития плода сроку беременности и позволяет диагностировать уже на ранних сроках беременности задержку внутриутробного развития плода. Эхография позволяет изучить структуру органов плода, плаценты, пуповины и околоплодных вод. При своевременном выявлении врожденных пороков развития плода при ультразвуковом исследовании возможно решение вопроса о дальнейшей пролонгации беременности или ее прерывании.

В основе метода лежит применение ультразвуковой волны, которая представляет собой упругие колебания частиц материальной среды с частотой свыше 20 000 Гц, т. е. они не воспринимаются человеческим ухом. Ультразвук способен распространяться в определенном направлении и имеет различную скорость распространения в разных по физическим свойствам средах. В мягких тканях организма человека скорость ультразвуковых волн равна 1540 м/с.

Современная ультразвуковая аппаратура основана на принципе эхолокации. Одним и тем же устройством (пьезоэлектрическим преобразователем) происходит излучение и прием ультразвуковых волн. Датчик, являясь источником и приемником ультразвуковых сигналов, преобразует их в электрические сигналы, которые в виде эхограмм воспроизводятся на мониторе ультразвукового аппарата.

При ультразвуковом исследовании диагностика маточной беременности возможна с ранних сроков (с 5-6-й недели от первого дня последней менструации, т. е. когда задержка менструации составляет 1 неделю и более). Для диагностики ранних сроков беременности применяют как трансабдоминальный, так и трансвагинальный доступ исследования. Для проведения трансабдоминального сканирования применяют методику наполненного мочевого пузыря. В обычных условиях матка и придатки недоступны для визуализации, так как ультразвуковые волны отражаются от петель кишечника. Достаточно наполненный мочевой пузырь отодвигает петли тонкого кишечника и является «акустическим окном» для визуализации, так как жидкость является идеальной средой для прохождения ультразвуковых волн. Оптимальным считается такое наполнение мочевого пузыря, когда он перекрывает дно матки.

Подготовка женщины к исследованию заключается в приеме жидкости около 1 л за 1,5–2 ч до процедуры. Для ускорения процесса наполнения мочевого пузыря можно использовать мочегонные препараты или его катетеризацию с введением стерильных растворов. При трансабдоминальном сканировании матка определяется как образование грушевидной формы за мочевым пузырем.