Валерий Семенов - Вирусные гепатиты А, Е, В, D, С у военнослужащих

В нуклеокапсиде (диаметр 25–27 нм) находится ядерный антиген (HBcAg) и антиген е (HBeAg). Кроме того, в ядре вируса (в нуклеокапсиде) находится ДНК–полимераза (обратная транскриптаза), протеинкиназа и собственно ДНК вируса, которая является частично двунитчатой и состоит из 3180 пар нуклеиновых оснований. ДНК вируса гепатита В включает в себя 4 гена (S, С, Р и X), перекрывающие друг друга. Ген S состоит из трех зон (Pre–S 1, Pre–S 2, собственно S–ген) и несет информацию о HBsAg и рецепторах, находящихся на поверхности и необходимых для проникновения вируса в гепатоцит. Ген С (сот) состоит из двух зон (Pre–С 1и собственно С–ген), кодирует белок нуклеокапсида, то есть белок сердцевины и его антигены (HBcAg и HBeAg). Таким образом, эти два антигена кодируются одним геном в виде одной нуклеотидной последовательности. Ген Р кодирует фермент ДНК–полимеразу. Ген X кодирует белок, активирующий экспрессию генов HBV и регулирует процессы гепатоканцерогенеза. В рамке считывания Х–гена имеются три стартовых кодона трансляции. При трансляции Х–гена образуются мРНК различной длины, и в результате трансляции синтезируются три различных полипептида. Функция этих полипептидов до конца не установлена. Они могут выступать трансактиваторами клеточных и вирусных генов, в т. ч. при трансформации гепатоцитов в раковые клетки.

Структура оболочки вируса представлена поверхностным антигеном – HBsAg и рецептором для полимеризированного альбумина. Внешняя оболочка вируса гепатита В содержит три белка: основной (главный), средний и большой. Каждый вирион вируса гепатита В состоит из 300–400 молекул главного белка и 40–80 молекул среднего и большого белков оболочки.

Основной белок – HBsAg состоит из 226 аминокислотных остатков и кодируется S–геном. Две молекулы главного белка, соединенные S–S мостиком, представляют димерную структурную единицу HBsAg и несут полностью его антигенные свойства с a, d, у, г, w и др. эпитопы. Циркулирующие в мире штаммы вируса гепатита В неоднородны по антигенной характеристике HBsAg. Известно несколько подтипов, отличающихся субдетерминантами: ad, ay, adw, adr и т.п., при этом, детерминанта «а» является группоспецифической, то есть общей для всех подтипов. Разрыв S–S связи ведет к диссоциации димера с потерей значительной части антигенности основного белка.

Средний белок оболочки состоит из 281 аминокислотных остатков, кодируемых pre–S 2– и S–генами при их совместной экспрессии. Полипептидная последовательность, кодируемая pre–S 2–фрагментом, выступает на поверхности молекулы и содержит рецептор для полимеризованного человеческого сывороточного альбумина. На поверхности гепатоцитов экспонированы полиальбуминовые антигены, что обуславливает связывание вируса гепатита В с клетками печени при участии pre–S 2–антигена. Антитела против полипептидной последовательности pre–S 2блокируют связывание вируса с гепатоцитами.

Большой белок оболочки вируса гепатита В кодируется одновременно pre–S 1–, pre–S 2– и S–генами и представлен полипептидами. Большой белок имеет вариабельную длину (389 и 400 аминокислотных остатков для ау и ad субтипов вируса, соответственно). N–концевая часть молекулы, кодируемая pre–S 1–геном, при сборке вириона экспонирована на поверхности частицы Дейна. В свою очередь на поверхности гепатоцитов имеются рецепторы для связывания pre–S 1–антигена. Большой белок вируса гепатита В с pre–S 1–антигеном способствует не только связыванию вируса с клеткой, но также обеспечивает проникновение вируса в цитоплазму и имеет решающее значение в проявлении инфекционных свойств вируса гепатита В.

В настоящее время описаны 9 генотипов вируса гепатита В: А, В, С, D, Е, F, G, Н и w4B. Эта информация имеет важное практическое значение, поскольку в последние годы установлено, что в той или иной зоне генома под действием различных факторов могут происходить точечные мутации. Это отражается на серологическом профиле маркеров, не укладывающемся в обычную трактовку результатов, и на клиническом течении HBV–инфекции.

Чаще всего обнаруживается мутант ВГВ – HBeAg–негативный вариант вируса. Образование данной мутантной формы вируса происходит в результате мутаций в преядерном регионе генома ВГВ. При этом вирусные частицы крупнее, чем классический (дикий) ВГВ. Нередко такой вирус называют вирусом гепатита В 2–го типа. При инфицировании вирусом гепатита В с мутацией в Pre–С–зоне может развиваться тяжелый гепатит В, с частыми рецидивами после терапии интерферонами, фульминантный гепатит, при котором HBeAg не выявляется. Инфицирование подобным мутантом ВГВ приводит к развитию заболевания даже у вакцинированных лиц, поскольку существующие в настоящее время вакцины состоят из продуктов S–гена «классического» (или «дикого») типа HBV. Необходимо отметить, что у человека, зараженного первоначально классическим диким штаммом HBV, могут появиться мутантные штаммы, это отражается на клиническом течении болезни и на серологическом профиле HBV–инфекции.

Сегодня установлены мутации остальных генов HBV, однако, клиническое значение их еще недостаточно понятно.

В крови инфицированных вирусом гепатита В кроме частиц Дейна обнаруживаются в большом количестве малые сферические и продолговатые тубулярные белковые частицы вирусного происхождения диаметром 20–22 нм. Эти частицы внутри полые, не содержат ДНК вируса, т.е. неинфекционные и состоят главным образом из HBs–антигена с небольшим содержанием pre–S 2–антигена. В сыворотках крови хронических носителей с репликацией вируса 20–22 нм сферические частицы содержат основной и средний белки в таких же соотношениях, что и оболочка вириона, но в 20 раз меньше содержат большого белка оболочки. В отсутствие репликации вируса сферические частицы в плазме в основном состоят из основного белка, так как содержат менее 1% среднего белка и совсем не содержат большого белка оболочки.

Для вируса гепатита В характерна высокая устойчивость в условиях окружающей среды. При комнатной температуре инфекционность вируса сохраняется 3 месяца, в холодильнике – 6 месяцев, в замороженном виде – 15–20 лет и в высушенной плазме крови – до 25 лет. При кипячении инактивация вируса происходит в течение 30 минут, в среде 1–2%–ного раствора хлорамина – через 2 часа, в 1,5%–ном растворе формалина – при 7 дневной экспозиции. Вирус устойчив к воздействию эфира, ультрафиолетового облучения. Высоко эффективно автоклавирование при 120°С. Инфекционная активность вируса гепатита В подавляется в течение 20 минут в 70%–ном растворе изопропилового спирта. В 80%–ном этиловом спирте вирус инактивируется в течение 2 минут.

Гепатит В – одна из самых распространенных в мире инфекций. На территории земного шара насчитывается более 2 млрд. человек, имеющих маркеры перенесенной HBV–инфекции. Приблизительно 400 млн. человек являются хроническими носителями HBV. Более 1 млн. смертей в мире ежегодно обусловлено HBV–инфекцией, включая циррозы печени и первичный рак печени (гепатокарциному).